产品货号：
JN0168
中文名称：
糖苷内切酶H
英文名称：
Endo H
产品规格：
10kU
发货周期：
1～3天
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Endo H是一种重组糖苷酶，能够专一切割β-1,4-糖苷键连接的高甘露糖型结构和某些杂合型糖蛋白，形成带有一个N-乙酰葡萄糖胺的糖蛋白结构。切割后的蛋白仍具有生物活性，不影响其功能等的后续研究。本制品克隆自褶皱链霉菌(streptomyces plicatus)并在E.coli中重组表达，经多步纯化获得。
- 去除糖蛋白的N-连接高甘露糖。
- 仅切割高甘露糖型结构（n=2-150,x=(Man)1-2,y=H）和杂合型结构（n=2,x和/或y=AcNeu-Gal-GlcNAc）。
| 组分 | 规格 |
| Endo H(500U/μL) | 20μL |
| 10×糖蛋白变性缓冲液 | 1mL |
| 10×Endo H反应缓冲液 | 1mL |
保存：-20℃
20mM Tris，50mM NaCl，5mM EDTA，pH7.5.
无外切糖苷酶污染，无蛋白水解活性。
在20μL的反应体系中，37℃条件下，1小时从10μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需的酶量定义为一个单位。
- 酶活性不受SDS影响。
- 要使天然糖蛋白去糖基化，可尝试增加酶量，延长温育时间。
将1×糖蛋白变性缓冲液（0.5% SDS,40mM DTT）中100℃煮沸10分钟使其变性，然后在1×Endo H反应缓冲液（50mM柠檬酸钠pH5.5,25℃）中于37℃温育，进行酶切反应。
- 按下表加入各成分配制变性反应体系。
成分 用量 10×糖蛋白变性缓冲液 1μL 底物 10μg ddH2O 至10μL - 100℃反应10min。
- 按下表加入各成分配制酶切反应体系。
成分 用量 10×Endo H反应缓冲液 2μL 上一步反应液 10μL Endo H(500U/μL) 1μL ddH2O 至20μL - 37℃反应1小时。
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